1 ? 北蟲草種植
1.1 ? 母種培養(yǎng)基制作
培育優(yōu)良、純正、健壯、適齡的菌種,是栽培北蟲草實現(xiàn)優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)的基礎(chǔ)。
A、母種培養(yǎng)基配方:馬鈴薯200-250克,葡萄糖15-20克,瓊脂20克,蛋白胨5克,磷酸二氫鉀2克,硫酸鎂1克,VB1五片,VB6一片,VB12一片,水1000毫升,PH6.8或自然。
B、制作及滅菌:土豆煮沸25分鐘過濾取濾清液,加入其它輔料微火溶化,趁熱加入空白試管中,18x180的試管加8毫升,20x200的試管加10-12毫升。每7-10支試管用繩子捆扎,試管口端包扎牛皮紙或無紡布。采用手提式高壓鍋的,排氣閥不要關(guān)閉,當(dāng)燒至蒸汽從排氣閥穩(wěn)定冒出2-3分鐘后,關(guān)閉排氣閥,待壓力升至0.5公斤時,打開排氣閥放掉冷空氣,讓壓力回至零,重新關(guān)閉排氣閥升壓至1.4公斤開始計時,滅菌30-32分鐘結(jié)束。讓其自然降壓降溫到80-90度時,輕輕地打開鍋蓋,移開一條縫,讓鍋里的余熱把包扎試管的被蒸汽弄濕的牛皮紙烘干,在試管的溫度差不多60度時取出,一頭放在一根1.3-1.5厘米高的木條上,讓其自然冷卻后就成為斜面。添加瓊脂的培養(yǎng)基的特性:是在95度時成為液體狀,低于45度時凝固成固體狀。瓊脂的這個特性,現(xiàn)在就被廣泛的應(yīng)用于生物培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)了。
1.2 ? 液體菌種的培養(yǎng)方法
? ? 常見的有采用搖床來生產(chǎn)的搖瓶培養(yǎng)法和采用發(fā)酵罐來生產(chǎn)的深層培養(yǎng)法。若少量生產(chǎn),可以用搖瓶培養(yǎng)法。深層培養(yǎng)需要一整套工業(yè)發(fā)酵設(shè)備,如鍋爐、空氣壓縮機、空氣凈化系統(tǒng)、發(fā)酵罐等,故投資大,只適用于工廠化的大規(guī)模生產(chǎn)。而搖瓶培養(yǎng)投資少,設(shè)備技術(shù)簡單,適合一般菌種廠生產(chǎn)使用。本節(jié)主要介紹搖瓶培養(yǎng)的技術(shù)方法。
液體培養(yǎng)基配方:
1、土豆200克,葡萄糖10克,蛋白胨3克,磷酸二氫鉀1.5克,瓊脂0.5克,維生素B1 二至五片,PH值6.8或自然,水1000毫升。土豆煮沸騰后25分鐘,過濾,加入其它營養(yǎng)輔料。
2、免煮配方1:蛋白胨15克,葡萄糖10克,磷酸二氫鉀1.5克,瓊脂0.5克,維生素B1 二至五片,PH值6.8或自然,水1000毫升。
3、免煮配方2:蛋白胨10克,酵母粉10克,玉米淀粉5克,葡萄糖10克,磷酸二氫鉀1.5克,瓊脂0.5克,Vb1-6片。PH6.8-7.水1000毫升。
2 ? 北蟲草種植技術(shù)
2.1 ? 搖瓶振蕩培養(yǎng)技術(shù)
? ? 培養(yǎng)液配制好后,裝入500mL容量的三角燒瓶中,每瓶裝量為100mL(旋轉(zhuǎn)式搖床裝量為350毫升),或者一個500毫升的鹽水瓶裝200-400毫升營養(yǎng)液,每瓶加入菜油5滴,起消泡作用。加棉塞后再包扎牛皮紙或無紡布封口,在1.4kg/cm2壓力下滅菌30-35分鐘,取出冷卻到30℃以下時,無菌條件下接入3-4塊約0.5厘米見方的斜面菌種,于20℃~22℃下靜置培養(yǎng)48-72小時,見菌種塊上菌絲萌發(fā)置于往復(fù)式搖床上振蕩培養(yǎng),振蕩頻率為80~100次/分,振幅6cm~10cm。如果用旋轉(zhuǎn)式搖床,振幅4厘米,振蕩頻率為120~200轉(zhuǎn)/分。培養(yǎng)室溫控制在20℃~21℃,蟲草液體菌種的培養(yǎng)時間一般是在4天左右(食用菌在5-7天)。培養(yǎng)結(jié)束的標(biāo)準(zhǔn)是:培養(yǎng)液清澈透明,液基中懸浮著大量小菌絲球,并伴有各種菌類特有的香味。
2.2 ? 手搖培養(yǎng)液體菌種技術(shù)
如果沒有搖床設(shè)備,可以用手搖來解決,每天搖2-5次,每次搖1-3分鐘,搖得多,菌絲也生長得快。可以把幾十個瓶子放在搖籃或吊床上一起搖。
2.3 ? 接種針
?做個接種針很簡單,用一根直徑2.5毫米的不銹鋼電焊條,前三分之一磨小了,頭部磨尖,離針尖0.4-0.5厘米處用鋼鉗折彎90度就好了,后面手把部分用塑料牙刷柄制作,方法是,將接種針尾端燒紅,插入牙刷柄即可。
2.4 ? 滅菌注意事項
采用壓力鍋滅菌母種用試管培養(yǎng)基和三角瓶時,必須用蒸格隔開,家用壓力鍋矮,試管只能斜放。蓋上蓋后,等蒸汽從鍋中央的孔中冒出來10分鐘后,蓋上限壓閥,待限壓閥上汽后開始計時,需要35-38分鐘的滅菌時間,此時,應(yīng)改為小火燒,維持限壓閥似起非起的狀態(tài),一定要有少量蒸汽從中間的限壓閥中冒出,如沒有蒸汽冒出,那就會造成滅菌溫度不到位,滅菌不徹底。
如果是滅菌米飯或小麥培養(yǎng)基,1公斤以上壓力60-90分鐘。
2.5 ? 批量生產(chǎn)栽培的滅菌
裝好瓶袋后,除寒冷的冬天外,一般必須立即進(jìn)行上鍋滅菌,將料袋堆積于滅菌平臺或灶倉內(nèi),料袋行之間必須留有空隙,以利蒸汽在料袋間穿透,不造成滅菌死角,最好用周轉(zhuǎn)筐。碼好堆后,蓋上雙層塑料薄膜,再蓋上無紡布保溫,最外層再覆上一層塑料薄膜,滅菌堆四周仔細(xì)壓上砂袋,防止蒸汽逃逸。通入蒸汽,用旺火盡快使料堆升溫至100度,料堆內(nèi)蒸汽飽和時,覆蓋的薄膜會鼓起成氣包狀,剛開始時,需排掉堆內(nèi)的冷空氣,料堆內(nèi)才會慢慢的達(dá)到100度,此后,再維持6-10小時(食用菌10-12小時),才能達(dá)到徹底滅菌的效果。此時才可以?;?,燜一天,待料溫下降至50-60度時出鍋為最好。